DAPI染色液(1mg/ml)
产品简介:
DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。DAPI,即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride,也称DAPI dihydrochloride,分子式为C16H15N5·2HCl,分子量为350.25,是可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,灵敏度高于EB。
DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm。DAPI和双链DNA结合后,最大激发波长为364nm,最大发射波长为454nm。DAPI染色液是浓缩的储存液,稀释后使用,一般推荐工作浓度为0.5~10μg/ml,用于固定细胞或组织的细胞核染色。
自备材料:
1、 荧光显微镜
2、 蒸馏水
3、 微量移液器
4、 PBS或生理盐水
操作步骤(仅供参考):
1、 根据实验具体要求,用无菌去离子水稀释到自己所需浓度,即为DAPI染色工作液。细胞染色时,一般推荐工作浓度为0.5~10μg/ml。
2、 对于细胞或组织样品,固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染,如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品3倍体积以上的DAPI染色液,充分混匀。
3、 室温放置5~8min。
4、 轻轻吸除DAPI染色液。
5、 用无菌的PBS或生理盐水清洗2~3次,每次3~5min。
6、 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。
染色结果:细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
注意事项:
1、 DAPI染色液(1mg/ml)应稀释至合适的浓度后使用。
2、 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。
3、 为减缓荧光淬片,可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、 避免反复冻融,否则容易失效。
5、 DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
6、 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
7、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。