BCA蛋白定量试剂盒
产品简介：
BCA蛋白定量法是目前常用的蛋白定量方法之一。本产品的原理是在碱性条件下，蛋白质将Cu2+还原为Cu+，Cu+与BCA试剂（Bicinchoninic Acid，二喹啉甲酸）形成紫色络合物，该络合物在562nm处有紫外吸收峰，与标准曲线对比，即可计算出待测蛋白的浓度。
BCA法快速、灵敏、稳定。以BSA（牛血清蛋白）溶液为蛋白质标准品溶液，测定范围为20~2000μg/ml。
注：
● 在低温条件或长期保存出现沉淀时，可搅拌或37℃温育使溶解，如发现细菌污染则应丢弃。
● 试剂A与试剂B用应密闭保存。
操作步骤：
A．96孔酶标板测定：
1、 BSA蛋白质标准工作液配制：用与待测蛋白样品一致的稀释液按下表稀释BSA标准品；
2、 体积比为50∶1的比例配制适量BCA工作液，充分混匀；
例子：BSA标准样品个数为7个，待测样品为2个，每个样品重复3次。
96孔检测法所需BCA工作液总量为：
（7个BSA标准品样品+2个待测品样品）×3×0.2ml=5.4ml；
再根据BCA-A和BCA-B体积比50∶1的比例计算所需量。但是由于加样过程中存在误差，建议多配2个孔的量。
3、 96孔板检测过程：
（1）将上述稀释好的BSA标准样品和待测样品各25μl分别加到做好标记的96孔板中，每个样品推荐做2-3个重复。
（2）每个孔加入200μlBCA工作液，充分混匀，盖上96孔板盖，37℃孵育30min，冷却至室温，去除气泡，在3~5min内完成检测。
（3）用酶标仪在540~590nm（建议是562nm，也可选择550/630nm）范围内检测96孔板中所有样品的吸光值。
（4）根据上述BSA标准品浓度和吸光值绘制标准曲线，计算待测样品蛋白浓度。
B．比色皿测定：
按照比色皿规格，与以上方法相同，适当按比例增加各溶液体积即可。
使用注意事项：
1、 由于该法检测时，吸光值会随时间延长而加深，因此，须在3~5min内完成检测，否则会影响蛋白浓度定量的准确性。
2、 建议去除背景值后的吸光值读数绘制标准曲线。
3、 使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发导致的误差。
4、 由于操作误差导致标准品读数严重偏离线性曲线的应该去除。
5、 试剂A和试剂B混合后可能会出现浑浊，充分混匀后消失。
6、 未知样品蛋白浓度可以从标准曲线方程计算得到，实际样品蛋白浓度需要乘以相应的稀释倍数。
7、 如果得到的蛋白浓度不在检测范围内，请重新稀释样品后再次测定。
8、 若样品中含有较高浓度的EDTA等螯合剂，建议选用Bradford法检测。
注意事项：
1、 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
2、 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
