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SNU16人胃癌细胞(STR鉴定)

货号:AW-CCH636

价格:¥2500

规格:1*106个

  • 产品概述
  • 细胞描述:

         SNU-16细胞是1987 年从一名 33 岁女性亚裔胃癌患者化疗前的腹水中分离出来。在癌症研究中使用这些细胞。该系是从化疗前采集的细胞建立的。SNU-16 细胞对 VIP 受体呈阳性,但缺乏胃泌素受体。在 N-myc、L-myc、myb 和 EGF 受体基因中没有发现扩增或重排的证据。c-myc 原癌基因被扩增,但表达的 c-erb-B-2 RNA 与其他细胞系相当。以下基因没有表达:N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2 或胃泌素释放肽。细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原 (CEA) 和 TAG-72。细胞是左旋多巴脱羧酶 (DDC) 阳性。

     

    细胞特性:

    1) 来源:女性,33岁,胃癌

    2) 形态:多细胞聚集体,悬浮生长

    3) 规格:1×106cells

    4) 培养条件:RPMI-1640培养基+10%优质胎牛血清+1%双抗 (推荐货号AW-MC002)

                           空气,95%;二氧化碳,5%

                           37℃


     收到细胞及处理

    1) 收到细胞后,活细胞首先观察培养瓶是否完好,培养液是否漏液,培养基是否浑浊;冻存细胞是否干冰已挥发完,冻存管盖是否脱落,破碎,若有这类情况,请务必拍照记录,并于收货24h内与我们联系。

    2) 细胞处理:

    常温的细胞:如果是T-25培养瓶活细胞,收到后请用75%的酒精对培养瓶表面进行消毒处理,然后转入培养箱中静置2~3h后再进行后续处理(细胞未长满,就去除原瓶培养基,加入适量新鲜培养基继续培养; 若已长满,需进行传代处理(参考下文))

     

    备注一:运输用的培养基不宜再次用来培养细胞,请按照说明书新配置完全培养基来培养细胞。(若您没有来得及准备合适的培养基,可以取少量(5~10ml)原瓶培养基,补充适量的血清培养,24h内更换新鲜完全培养基) 

       备注二:个别细胞由于贴壁松散,运输过程可能会导致脱落; 或者冬天温度低细胞出现收缩漂浮,属于不可避免因素,请您先静置观察2-4h时,待细胞稳定后会贴回,若未贴回的细胞,请您离心收集悬浮细胞沉淀再重新加入到新的培养瓶/皿中,正确处理后都可以恢复正常生长。  

     

    冻存细胞:干冰运输的冻存细胞,收到后请立即安排复苏或者转入液氮存储或者短暂(24h)放置-80度冰箱保存(长时间-80度保存可能会影响细胞活力)。


    细胞复苏、传代及冻存流程参考:

    1、 细胞复苏

    1) 配制完全培养基:基础培养基+胎牛血清+双抗(特殊培养基特殊配置);

    2) 细胞复苏:取5ml完全培养基于15ml离心管中,37℃水浴锅预热,从液氮管(或者-80度冰箱)中快速取出冻存的细胞,放入37℃水浴锅中,摇晃使快速化冻(1min左右),然后将化冻的细胞和预热的培养基,移入超净工作台中,化冻的细胞加入到含预热培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

    3) 吸弃上清,得到细胞沉淀,用2ml完全培养基轻轻重悬细胞,加入到T25培养瓶中,做好标记,放入37℃,5%CO2饱和适度培养箱中培养(培养皿复苏效果更好);

    4) 24h后,观察细胞贴壁情况(未贴壁的即为死细胞--针对贴壁细胞),吸弃旧培养基,加入新鲜的预热(室温或37℃)的完全培养基,继续培养。

     

    2、 细胞传代(悬浮细胞不用胰酶消化的过程,直接进行离心收集细胞沉淀或者半量换液)

    1) 待细胞生长到80% -90%汇合度时,吸弃旧的培养基,加入1ml无菌PBS润洗一次,以去除残余的培养基及血清(血清含有胰酶的抑制因子),然后加入1ml 0.25%胰酶,消化 (10s~2min不等,不同细胞消化时间不同,以细胞收缩变圆为准,第一次消化,建议镜下实时观察消化,以确定您实验室对该细胞消化的最优条件 ,避免消化过度);

    2) 加入1ml完全培养基(含FBS)终止消化,轻轻拍打,使细胞脱落下来成单个细胞悬液,收集细胞于15ml无菌离心管中,1000rpm,离心5min;

    3) 收集细胞沉淀,完全培养基重悬,一分为二(可根据细胞生长速度调整比例),分别加入到2个新的培养瓶中,做好标记,放入培养箱中培养。

     

    3、细胞冻存

    1) 按照细胞传代方法,在超净工作台内消化收集细胞沉淀,取少量细胞用于计数;

    2) 用预冷的1ml冻存液(90% 完全培养基+10% DMSO)或者无血清细胞冻存液重悬细胞,加入到1.2ml冻存管中,密度为1*106个/ml。

    3) 放入程序冻存盒,-80℃过夜后,转入液氮长期保存。

     

     


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