AML12细胞专用培养基由abiowell技术团队精心筛选验证，经过长期测试，本产品可保持AML12细胞最佳的生长状态。本产品中已包含AML12细胞生长所需的各种成分，无需额外添加任何成分，可直接用于AML12细胞的体外培养。
成脂诱导分化培养基
产品简介：
本产品专门为干细胞成脂诱导分化而开发，针对不同类型的间充质干细胞的特性优化分化试剂的配方。本产品经过实验测试，可以用于不同类型间充质干细胞，前体脂肪细胞以及3T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞) 的成脂诱导。
本产品含血清成分，仅用于科研用途，不可用于诊断、治疗、临床及其他用途。
产品规格组成：
名称 | 货号 | 规格 |
成脂诱导分化培养基 | AW-MY002 | 200mL（100+100） |
成脂诱导分化培养基 | AW-MY002 | 400 mL（200+200） |
成脂诱导分化培养基A液：
成分 | 体积（100ml/200ml） | 有效期 |
基础培养基A | 89ml/178ml | 2-8℃ ，1年 |
FBS | 10ml/20ml | -20℃，5年 |
A液-1 | 100ul/200ul | -20℃，1年 |
A液-2 | 100ul/200ul | -20℃，1年 |
A液-3 | 1ml/ 2ml | -20℃，1年 |
成脂诱导维持培养基B液：
成分 | 体积（100ml/200ml） | 有效期 |
基础培养基B | 90ml/ 180ml | 2-8℃ ，1年 |
FBS | 10ml/20ml | -20℃，5年 |
B液-1 | 100ul/200ul | -20℃，1年 |
油红O染色液 | 5ml/10ml | 2-8℃ ，1年 |
明胶水溶液（0.2%） | 5ml/10ml | 2-8℃ ，1年 |
注意：
1.为保证产品的有效性，请不要反复冻融。
2.配制好的诱导培养基保存于2-8℃，有效期为1个月，请根据实验用量合理配制。
产品使用方法：
一、成脂诱导分化培养基配制
1、本产品为试剂盒型，使用前需将试剂盒内各成分试剂混匀。（请勿将A液与B液混淆）
2、使用前，请将血清（FBS）置于4℃化冻，直至血清完全溶解；待血清完全溶解后，将所有添加物于室温溶解。待试剂完全溶解后，将试剂加入到对应培养基中
注：（1）为了保证微量试剂的使用效果，添加试剂前请将试剂管进行短暂离心，使试剂能全部收集至管底。
（2）无菌吸取试剂管中的试剂成分，将枪头伸至培养基液面下方注入，轻微吹打洗涤枪头。再吸取少量培养基洗涤试剂管，尽可能将所有组分完整地加到基础培养基中，保证培养基的效果。
（3）试剂配制应全程在无菌操作台进行。
二、成脂诱导分化细胞准备（以大鼠骨髓间充质干细胞，六孔板培养为例）
1、间充质干细胞的融合度达到 80~90%时，用0.25%胰酶进行消化，注意干细胞生长密度不宜过大，易成片脱落。
2.将消化下来间充质干细胞进行计数，根据计数结果，按 2~3×104 cells/cm2 的细胞密度接种在六孔板中，每孔加入 2 mL 的间充质干细胞完全培养基，置于37℃，5% CO2 的培养箱中进行培养。
4. 当细胞融合度达到 100%时（细胞过饱和有利于激发干细胞的成脂潜能），小心的将孔内完全培养基吸走，向六孔板中加入 2 mL 成脂诱导分化培养基A液（为防止细胞诱导过程因细胞密度过大出现细胞回缩或漂浮现象，建议铺板前用明胶包被六孔板过夜后使用）。
5. 诱导3天后，吸走六孔板的诱导完全培养基，每孔加入 2 mL 成脂诱导分化培养基B液。
6. 成脂诱导分化培养基B液诱导一天后，吸走B液，更换为成脂诱导分化培养基A液，继续进行诱导3天。
7. A、B 两种培养基交替诱导3~5 次后，当观察到干细胞内出现明显的、足够多的脂滴后，即可结束诱导，根据实验需求对细胞进行染色和后续鉴定。
三、油红O染色
1. 成脂诱导实验结束后，可进行油红O染色确定诱导效果。
2. 吸走孔板里的成脂诱导分化完全培养基，用 1×PBS 润洗 1~2 遍。
3. 加入4%多聚甲醛溶液（覆盖细胞表面即可），对细胞固定 30 分钟。
4. 细胞固定期间，可配制油红O 工作液（饱和油红 O 溶液：蒸馏水=3:2，混匀后用中性滤纸过滤或1500rpm离心去掉残渣）。
5. 吸走4%多聚甲醛溶液，用 1×PBS 润洗 1~2 遍。
6. 以六孔板为例，每孔加入 1mL 油红 O 工作液，室温染色 30 分钟。
7. 吸走油红 O 工作液，用清水润洗至背景杂质洗干净，即可在显微镜下观察诱导和染色效果。（为保证实验效果，建议油红O不要重复使用）
