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SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

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货号:AWB0058

价格: ¥160

规格: 30T 150T

  • 产品概述
  • 产品介绍

    聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE),其原理在于聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛选效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE);非变性聚丙烯酰胺凝胶蛋白质能够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开,主要用于分离蛋白质和寡核苷酸。

    SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶,也可配制非变性(native)PAGE凝胶,30T一般可以配制30~40块,具体配制的量应根据具大小决定。


    产品规格

    名称AWB0058a(30T)AWB0058b(150T)保存条件
    试剂(A):30%Acr-Bis(29∶1)100ml500ml4℃
    试剂(B):1.5M Tris-HCl, pH8.8100ml500mlRT
    试剂(C):10% SDS5ml25mlRT
    试剂(D):Ammonium Persulfate0.5g1.5gRT
    试剂(E):1M Tris-HCl, pH6.815ml75mlRT


    保存条件

    RT保存,其中试剂(A)4℃保存。


    实验前材料准备

      1、TEMED或者PAGE胶促凝剂,需自备。


    使用方法

    1、配制10%过硫酸铵:直接在0.5g Ammonium Persulfate中加入5ml蒸馏水,充分溶解,分装成小份储存于-20℃或4℃。

    2、根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度,按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(下层胶):


    不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:

    SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围
    6%胶50-150 KD
    8%胶30-90 KD
    10%胶20-80 KD
    12%胶12-60 KD
    15%胶10-40 KD

    注:过硫酸铵若是粉末配制成10%溶液(0.5g APS溶解在5ml蒸馏水中)后,分装成小管-20℃保存,通常半年内有效。


    注意事项

    1、过硫酸铵配制成10%溶液后应当4℃保存。应尽量减少室温存放时间以防失效。

    2、TEMED需自备。

    3、配制聚丙烯凝胶的过程中,如果室温较低,可以置于37℃放置,加速凝固。

    4、30% Acr-Bis(29∶1)有轻微神经毒性,请小心操作。

    5、为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

    6、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。


    附录:SDS-PAGE凝胶配方表

    配制不同体积浓缩胶(4.8% Acrylamide)所需各成分的体积(mL)
    成分123456810
    双蒸水0.681.42.12.73.44.15.56.8
    30%Acrylamide0.170.330.50.670.831.01.31.7
    1.0M Tris-HCl(PH 6.8)0.130.250.380.50.630.751.01.25
    10%过硫酸铵(APS)0.010.020.030.040.050.060.080.1
    10% SDS0.010.020.030.040.050.060.080.1
    TEMED(自备)0.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0080.01


    6%分离胶配方表:

    配制不同体积6%分离胶所需各成分的体积(mL)
    成分510152025304050
    双蒸水2.65.37.910.613.215.921.226.5
    30%Acrylamide1.02.03.04.05.06.08.010.0
    1.5M Tris-HCl(PH 8.8)1.32.53.85.06.37.510.012.5
    10%过硫酸铵(APS)0.050.10.150.20.250.30.40.5
    10% SDS0.050.10.150.20.250.30.40.5
    TEMED(自备)0.0040.0080.0120.0160.020.0240.0320.04


    8%分离胶配方表:

    配制不同体积8%分离胶所需各成分的体积(mL)
    成分510152025304050
    双蒸水2.34.66.99.311.513.918.523.2
    30%Acrylamide1.32.74.05.36.78.010.713.3
    1.5M Tris-HCl(PH 8.8)1.32.53.85.06.37.510.012.5
    10%过硫酸铵(APS)0.050.10.150.20.250.30.40.5
    10% SDS0.050.10.150.20.250.30.40.5
    TEMED(自备)0.0030.0060.0090.0120.0150.0180.0240.03


    10%分离胶配方表:

    配制不同体积10%分离胶所需各成分的体积(mL)
    成分510152025304050
    双蒸水1.94.05.97.99.911.915.919.8
    30%Acrylamide1.73.35.06.78.310.013.316.7
    1.5M Tris-HCl(PH 8.8)1.32.53.85.06.37.510.012.5
    10%过硫酸铵(APS)0.050.10.150.20.250.30.40.5
    10% SDS0.050.10.150.20.250.30.40.5
    TEMED(自备)0.0020.0040.0060.0080.010.0120.0160.02


    12%分离胶配方表:

    配制不同体积12%分离胶所需各成分的体积(mL)
    成分510152025304050
    双蒸水1.63.34.96.68.89.913.216.5
    30%Acrylamide2.04.06.08.010.012.016.020.0
    1.5M Tris-HCl(PH 8.8)1.32.53.85.06.37.510.012.5
    10%过硫酸铵(APS)0.050.10.150.20.250.30.40.5
    10% SDS0.050.10.150.20.250.30.40.5
    TEMED(自备)0.0020.0040.0060.0080.010.0120.0160.02


    15%分离胶配方表:

    配制不同体积15%分离胶所需各成分的体积(mL)
    成分510152025304050
    双蒸水1.12.33.44.65.76.99.211.5
    30%Acrylamide2.55.07.510.012.515.020.025.0
    1.5M Tris-HCl(PH 8.8)1.32.53.85.06.37.510.012.5
    10%过硫酸铵(APS)0.050.10.150.20.250.30.40.5
    10% SDS0.050.10.150.20.250.30.40.5
    TEMED(自备)0.0020.0040.0060.0080.010.0120.0160.02


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