产品介绍
结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维,而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Massom三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量都很大,因此Massom染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝),主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
Massom三色染色的特点:①染色稳定;②分化时间短,1~2s;③色彩清晰鲜艳;④适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
自备材料
1、 固定液:选用甲醛升汞或甲醛盐溶液
2、 系列乙醇
3、 蒸馏水
使用方法
1、 切片常规脱蜡至水,用Mayer苏木素染色30s~3min,水洗。
2、 用Masson蓝化液或1×PBS返蓝,镜下观察苏木素染色效果,不可有过深蓝色背景,以免影响后续染色效果。
3、 若蓝色背景过深,则用酸性乙醇分化液褪色,水洗。
4、 滴加丽春红S染色液染色1~8min,蒸馏水冲洗。
5、 用弱酸工作液冲洗0.5min~1min。
6、 滴加磷钼酸溶液分化1~5min,弃去磷钼酸溶液。(注意事项7)
7、 直接滴加苯胺蓝染色液染色0.5~2min,蒸馏水冲洗,镜下观察染色效果,蓝色不足,可以加染。苯胺蓝染色时间不可过长,以免遮盖丽春红S染色液染色效果。
8、 60℃恒温箱烘干残留蒸馏水或95%乙醇快速脱水,无水乙醇脱水3次,每次5~10s。
9、 二甲苯透明3次,每次1~2min。中性树胶封固。
染色结果
细胞核,胶原纤维/蛋白 | 蓝色 |
胞浆、肌肉、红细胞 | 红色 |
注意事项
1、 切片脱蜡应尽量干净。固定起着重要的作用,使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
2、 不同的样品染色时间不同,其染色效果不同,可预先做预实验确定染色时间和染色效果。
3、 酸性乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
4、 苏木素染细胞核应当以细胞核蓝色较深,且除细胞核以外无蓝色或较浅蓝色背景为准。
5、 弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳,如使用量大可自行配制0.1~0.3%乙酸溶液予以替代。
6、 磷钼酸分化时要在镜下控制,分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定。
7、 分化完之后,应当快速滴加苯胺蓝染色液。若出现磷钼酸干片现象,会出现苯胺蓝染色液不上色的情况发生。
8、 Masson蓝化液亦可自行配制Scott促蓝液或0.1~1%碳酸锂水溶液或1×PBS予以替代返蓝。
9、 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
10、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
产品规格
名称 | AWI0253a (7×50ml) | AWI0253b (7×100ml) | storage |
试剂(A): Mayer苏木素染色液 | 50ml | 100ml | RT,避光 |
试剂(B):酸性乙醇分化液 | 50ml | 100ml | RT |
试剂(C):Masson蓝化液 | 50ml | 100ml | RT |
试剂(D):丽春红S染色液 | 50ml | 100ml | RT,避光 |
试剂(E):弱酸溶液 | 50ml | 100ml | RT |
试剂(F):磷钼酸溶液 | 50ml | 100ml | RT |
试剂(G):苯胺蓝染色液 | 50ml | 100ml | RT,避光 |
注意:
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗。食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。